前言
阿维菌素（abamectin）是由日本北里大学大村智等和美国merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，由链霉菌中灰色链霉菌streptomyces avermitilis发酵产生，具有强烈杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯，农畜两用抗生素。广谱、高效、安全。具有胃毒和触杀作用，不能杀卵。其作用机制是干扰神经生理活性，影响细胞膜氯化物传导。sn/t1973-2007规定了在进出口食品中阿维菌素方法检出限为5 μg/kg。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
ab sciex api 4000 液相质谱联用仪
试剂材料
乙腈、乙酸均为色谱纯；实验用水为超纯水；无水硫酸钠为分析纯；
阿维菌素标准品（纯度99%）；
一次性无菌注射器；针式过滤器(0.22 μm，直径13 mm)；
cleanert alumina n固相萃取柱：1 g/3 ml
样品制备
样品提取
称取5.00 g(精确到0.01 g)均质好的样品，置于50.0 ml离心管中，加入5 g无水硫酸钠和15.0 ml 乙腈，用均质器10000 rpm均质2 min, 3000 rpm离心5 min，取上清液经无水硫酸钠过滤并转入浓缩瓶中，用10 ml乙腈再提取一次，合并提取液。40℃水浴中旋蒸浓缩至2~3 ml。
样品净化
先将cleanert alumina n(1 g/3 ml)小柱用3 ml乙腈预淋洗，将样品转入spe柱(流速控制在2~3 ml/min)，用5 ml乙腈分两次洗涤浓缩并将洗涤液转入spe柱，再用2 ml乙腈淋洗小柱，收集全部流出液。50℃氮气吹干，用1 ml 乙腈复溶，过0.22 µm滤膜后待测。
实验条件
液相条件
色谱柱：venusil mp c18，2.5 μm，100 å，2.1 × 50mm
流动相：a相-0.1%乙酸水溶液，b相-乙腈
等度洗脱：0-6.0 min，a:b=25:75 (v/v)
流速：350 μl/min
柱 温：35℃
进样量：5 µl
质谱条件
离子源：电喷雾离子源
扫描方式：负离子扫描
电喷雾电压：-5500 v
雾化气压力：55 psi
气帘气压力：12 psi
辅助气压力：55 psi
离子源温度：550℃
采集方式：多反应监测(mrm)
q1、q3均为单位分辨率
质谱参数(见表1)
表1. 阿维菌素质谱参数
化合物 | q1 | q3 | ce/v |
阿维菌素（abamectin） | 871.6 | 228.9 | -46 |
565.8 | -37 |
结果与讨论
实验结果
由表2可知，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱法检测阿维菌素加标回收率在75%~90%之间，rsd值在5.46%~8.50%之间，能够满足检测要求。由图1和图2可看出经cleanert alumina n固相萃取柱净化，采用venusil mp c18色谱柱检测得到的阿维菌素峰形良好，且保留时间稳定。
表2. 阿维菌素加标回收实验结果(n=3)
物质名称 | 加标量/(μg/kg) | 处理加标回收率/% | rsd/% | rt/min | |
阿维菌素 （abamectin） | 5 | 78.05 | 8.50 | 2.54 | |
50 | 84.25 | 5.46 | |||
图1. 阿维菌素样品加标5 μg/kg液相色谱/串联质谱质量色谱图
图2. 阿维菌素样品加标50 μg/kg液相色谱/串联质谱质量色谱图
结论
本实验建立了阿维菌素残留量检测的lc-ms/ms检测方法，并结合固相萃取技术对猪肉中阿维菌素的残留量进行了测定。对于加标量为5 μg/kg、50 μg/kg的样品进行了检测，回收率在75%~90%，符合国标要求，固相萃取方法稳定并且色谱柱重现性良好，说明本方法能够用于检测动物源性食品中的阿维菌素残留量。
订货信息
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil mp c18 | 2.5 um，100 å，2.1 × 50mm | 1支 | va920502-0 |
cleanert® alumina n | 1 g/3 ml | 30支/pk | al0003-n |
保护柱套 | 适用于4.6 × 10mm和2.1 × 10mm | 1支 | sh-100 |
直联式保护柱芯 | 2.5 μm，100 å；2.1 × 10mm | 4/pk | va920102-0s |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.22 μm | 200个/包 | as021320 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
乙腈 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
qdaura®卓睿全自动固相萃取仪 | 4 通道 24 位 | 1 台 | spe-40 |
15位氮吹仪 | 15位 | 1 台 | nv15-m |
应用编号：af10031
