地塞米松(dexamethasone)又名氟美松、氟甲强地松龙、德沙美松，是糖皮质类激素，其衍生物有氢化可地松、泼尼松等，地塞米松是较为常见的易残留兽药。兽药在动物性食品中的残留，不仅对人体健康造成直接危害，而且对畜牧业发展和生态环境也造成危害。长期食用兽药残留的食品，会造成兽药在体内蓄积，当其浓度达到一定量时，就会使人体产生多种急性或慢性中毒。地塞米松是激素类药物，能扰乱体内激素分泌，降低机体免疫力，造成肌肉萎缩无力，骨质疏松和生长迟缓等直接危害，而且还会出现发热，软弱无力，精神沉郁，食欲不振，血糖和血压下降等症状。中国和欧盟规定了在动物组织中喹诺酮类兽药的最高残留量为0.1μg/kg。
(1) 样品提取
称取5.0g(精确到0.1g)均质好的样品，置于50ml离心管中，加入20ml 乙酸乙酯，用均质器均质1min，在振荡器上振荡20min，3000rpm离心5min；取上清液过盛有25g无水硫酸钠的滤纸漏斗至鸡心瓶中；重复一次，合并提取液并旋蒸至近干，1ml乙酸乙酯和5ml正己烷复溶。
(2) 净化方法
先将cleanert® silica (500mg/3ml)小柱分别用2ml丙酮:正己烷(2:8，v/v)活化平衡，然后将待净化液过柱(流速控制在2~3 ml/min)，弃去滤液；再用2ml丙酮:正己烷(4:6，v/v)淋洗洗瓶和spe柱，弃去淋洗液，将小柱负压抽干；最后用6ml丙酮:正己烷(4:6，v/v)洗脱。收集洗脱液于40℃氮气吹干，用1ml 0.1%甲酸水溶液:乙腈(1:1，v/v)溶解残留物，过0.22μm尼龙针式过滤器后待测。
(3) 检测方法
3.1 色谱条件
色谱柱：venusil mp c18，2.1×50mm，2.5μm，100å；
流动相：a相-0.1%甲酸水溶液，b相-0.1%甲酸乙腈
柱 温：35℃；
进样量：5μl；
梯度洗脱：见表1
时间(min) | 流速 (ml/min) | a/% | b/% |
0 | 0.45 | 85 | 15 |
1.5 | 0.45 | 85 | 15 |
5 | 0.45 | 45 | 55 |
5.01 | 0.45 | 10 | 90 |
6 | 0.45 | 10 | 90 |
6.01 | 0.45 | 85 | 15 |
8 | 0.45 | 85 | 15 |
3.2 质谱条件
离子源：电喷雾离子源 扫描方式：正离子扫描
电喷雾电压：5500 v 雾化气压力：45 psi
气帘气压力：13 psi 辅助气压力：50 psi
离子源温度：500℃ 采集方式：多反应监测(mrm)
q1、q3均为单位分辨率
质谱参数(见表2)
(4) 实验结果
由表3可知，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱法检测地塞米松加标回收率在95%~105%之间，rsd值在3.50%~8.00%之间，能够满足检测要求。由图1和图2可看出经cleanert silica固相萃取柱净化，采用venusil mp c18色谱柱检测得到的地塞米松峰形良好，且保留时间稳定。
图1 地塞米松样品加标0.2μg/kg液相色谱/串联质谱质量色谱图：
图2 地塞米松样品加标2.0μg/kg液相色谱/串联质谱质量色谱图：
结论：
本实验建立了地塞米松残留量的lc-ms/ms检测方法，并结合固相萃取技术对猪肉中地塞米松的残留量进行了测定。对于加标量为0.2μg/kg、2.0μg/kg的样品进行了检测，回收率在95%~105%，符合国标要求，固相萃取方法稳定并且色谱柱重现性良好，说明本方法能够用于检测动物源性食品中的地塞米松残留量。
(5) 订货信息：
产品名称 | 规格包装 | 订货号 |
venusil mp c18 | 2.5μm,100å,2.1×50mm | va920502-0 |
cleanert silica | 500mg/3ml,50/pk | si5003 |
保护柱套 | 适用于4.6×10mm和2.1×10mm | sh-100 |
直联式保护柱芯 | 2.5μm,100å,2.1×10mm | va920102-0s |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写32×11.6mm,100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫,45．shore a 1.0 mm,100/pk | 0915-1819 |
针式过滤器(nylon) | 13mm,0.22μm,200/pk | as021320 |
一次性注射器 | 2ml两件式 无针头,100/pk | lzsq-2ml |
乙腈uv级 | 4l/瓶,色谱纯 | 015-4 |
正己烷hplc | 4l/瓶,色谱纯 | ah216-4 |
应用编号：af10032
