(1) 样品提取
称取5g经匀浆处理的样品于100ml离心管内，分别加入含有edta2na的柠檬酸缓冲液30ml、20ml，混合震荡提取，合并上清液。加入20ml正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层待净化。含有edta2na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/l柠檬酸缓冲溶液307ml和0.5mol/l磷酸氢二钠缓冲溶液193ml混合均匀，向其中加入1.86gedta2na，溶解后作为样品提取液。
(2) 净化方法
把cleanert ps固相萃取柱置于qdaura卓睿全自动固相萃取仪，上述提取液转移至上样管，设置萃取程序如下：10ml甲醇，10ml水，5ml edta2na活化ps柱，上样管中溶液全部上样，10ml水淋洗小柱，空气抽干，最后10ml甲醇洗脱目标物，收集。以上操作步骤流速均为1ml/min。
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃。
定容：加入1.0ml的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行hplc分析。
(3) 色谱条件
色谱柱：venusil mp c18，5μm， 4.6×250mm
流动相：a：b=77：23
a：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸、镁，0.37edta2na 溶于800ml水中，用冰乙酸调ph到7.2，加水定容到1000ml.
b：乙腈
(4) 实验结果：
| 名称 | 回收率-1 | 回收率-2 |
| 土霉素 | 128% | 137% |
| 四环素 | 91.80% | 97.40% |
| 金霉素 | 88.50% | 87.10% |
| 强力霉素 | 97.30% | 95.30% |
(5) 订货信息：
| 产品名称 | 规格包装 | 订货号 |
| qdaura卓睿全自动固相萃取仪 | 4通道24位 | spe-40 |
| lc-10f高效液相色谱仪 | 10ml/min，梯度系统，200-800nm双波长检测器 | fl-lc010gs |
| cc-100分析型色谱柱温箱 | 温控范围：5-70℃；可安装1-2支300mm色谱柱 | cc-100 |
| cleanert ps固相萃取柱 | 200mg/6ml, 30支/pk | ps2006 |
| venusil mp c18液相色谱柱 | 4.6×250mm, 5μm, 100å | va952505-0 |
| 针式过滤器(ptfe亲水) | 0.22μm,直径13mm,200个/pk | as081320 |
| 一次性无针头注射器 | 5ml,100/pk | zsq-5ml |
| 1.5ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写32×11.6mm, 100/pk | 1109-0519 |
| 1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫,45．shore a 1.0mm,100/pk | 0915-1819 |
| 甲醇 | 4×4l/箱 | ah230-4 |
| 乙腈 | 4×4l/箱 | ah015-4 |
应用编号：mf10007
