1.执行标准
《gb 5413.37—2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素m1 的测定》
2.样品前处理
牛乳样品：
• 称取 50 ml 牛乳样品，加热到 35℃~37℃；
• 于 10000r/min 离心 15 min；
• 去除乳脂及沉淀，取上层全部溶液用于上样检测。稀释倍数：0.02固体奶粉及制品：
• 10 g 固体样品，用 50 ml 50℃ 热蒸馏水溶解混匀；
• 冷却至 20℃，并定容至 100 ml；
• 于 10000 r/min 离心15 min；
• 去除乳脂及沉淀；
• 取上层溶液10 ml，用蒸馏水定容至50 ml；
• 取定容后的液体，全部用于上样检测。稀释倍数：1
3.操作步骤
• 取出免疫亲和柱，将上方塞子取出斜剪断，再插回亲和柱上；(3 ml 的免疫亲和柱去掉上方塞子，安装上转接头，将转接头另一端与针筒固定后使用)
• 将柱子与气控操作架上的针筒连接固定，处理后的溶液上样；
• 去掉亲和柱下方堵头，调节开关，使液体以 1~2d/s 的速度流出；
• 待液体排干后，更换新针筒，用 10 ml 蒸馏水洗涤 1次，流速 2~3d/s；
• 待液体排干后，更换新针筒，上样 1 ml 甲醇，用样品瓶接洗脱液，流速 1d/s；
• 洗脱后液体可用于检测。
4. 注意事项
• 使用前，免疫亲和柱需回至室温 (22~25℃)。
• 每次上样前都要将上次液体完全排干。
• 也适用于 gb 5413.37-2010。
5.色谱条件
色谱柱：venusil® xbp c18(l)；150 mm×2.1 mm，5 μm；
流动相：a 液，0.1% 甲酸溶液；
b 液，乙腈:甲醇溶液 (1:1)；
流 速：1.0 ml/min； 柱 温：35℃；
试液温度：20℃； 进样量：10 μl；
梯度洗脱：
时间(min) | 流动相a% | 流动相b% | 梯度变化曲线 |
0 | 68 | 32 | - |
4.2 0 | 55 | 45 | 6 |
5.0 0 | 0 | 100 | 6 |
5.7 0 | 0 | 100 | 1 |
6.0 0 | 68 | 32 | 6 |
注：1为即时变化,6为线性变化。
检测方式：多离子反应监测(mrm)，详见表1中母离子、子离子和碰撞能量。
离子源控制条件：
电离方式 | 电喷雾电离，负离子 |
毛细管电压(kv) | 3.5 |
锥孔电压(v) | 45 |
射频透镜1电压(v) | 12.5 |
射频透镜2电压(v) | 12.5 |
离子源温度(℃) | 120 |
锥孔反吹气流量(l/h) | 50 |
脱溶剂气温度(℃) | 350 |
脱溶剂气流量(l/h) | 500 |
电子倍增电压(v) | 650 |
6.订货指南
产品名称 | 规格包装 | 订货号 |
venusil® xbp c18(l) | 2.1×250 mm, 5 μm, 100 å | vx951502-l |
黄曲霉毒素 m1免疫亲和柱 | 3 ml | bac09003-1 |
7. 质控指标
项目：黄曲霉毒素m1
标准：gb5413.37—2010
限量：0.5 μg/kg
表1 离子选择参数表 | ||||||
黄曲霉毒素 | 母离子 | 定量子离子 | 碰撞能量 | 定性子离子 | 碰撞能量 | 离子化方式 |
m1 | 329 | 273.5 | 22 | 259.5 | 22 | esi |
应用编号：af10018
