前言
环丙沙星为合成的第三代喹诺酮类抗菌药物，具广谱抗菌活性，杀菌效果好，几乎对所有细菌的抗菌活性均较诺氟沙星及依诺沙星强2～4倍，对肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、淋球菌、链球菌、军团菌、金黄色葡萄球菌具有抗菌作用。
表1. 环丙沙星样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
环丙沙星 | ciprofloxacin |
| c17h18fn3o3 | 331.34 | 85721-33-1 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器
试剂材料
屈臣氏水、乙腈为色谱纯、磷酸、三乙胺为分析纯；
环丙沙星样品
高效液相色谱柱：venusil mp c18(2)；5 µm，110 å，4.6 × 250 mm。
样品制备
有关物质供试品溶液：取本品约25 mg，精密称定，加7%磷酸溶液0.2 ml溶解后，用流动相a定量稀释制成每1 ml中约含0.5 mg的溶液；
含量测定溶液：取本品约25 mg，精密称定，加7%磷酸溶液0.2 ml溶解后，用流动相a定量稀释制成每1 ml中约含0.1 mg的溶液；
系统适用性溶液：称取氧氟沙星对照品、环丙沙星对照品和杂质i对照品各适量，加流动相a溶解并稀释制成每1 ml中约含氧氟沙星5 µg、环丙沙星0.5 mg和杂质i 10 µg的混合溶液。
色谱条件
含量测定色谱条件
色谱柱：venusil mp c18(2)；5 µm，110 å；4.6 × 250 mm；
流动相：0.025mol/l磷酸溶液︰乙腈=87︰13（三乙胺调节ph=3.0）；
流 速：1.5 ml/min；
波 长：278 nm；
柱 温：30℃；
进样量：20 µl。
有关物质色谱条件
色谱柱：venusil mp c18(2)；5 µm，110 å；4.6 × 250 mm；
流动相a：0.025mol/l磷酸溶液︰乙腈=87︰13（三乙胺调节ph=3.0）；b：乙腈；
流 速：1.5 ml/min；
波 长：278 nm；
柱 温：30℃；
进样量：20 µl。
梯 度：
表2.梯度洗脱程序
时间/min | 流动相a（%） | 流动相b（%） |
0 | 100 | 0 |
16 | 100 | 0 |
53 | 40 | 60 |
54 | 100 | 0 |
65 | 100 | 0 |
结果与讨论
本实验采用venusil mp c18(2)色谱柱对环丙沙星进行了测定，由表3及图1可知，系统适用性溶液中环丙沙星与氧氟沙星和杂质i峰的分离效果较好，符合检测要求。
表3.环丙沙星相关样品测试结果
样品名称 | 化合物名称 | 保留时间/min | 相对保留时间rrt | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 | 备注 |
系统适用性溶液 | 杂质1 | 5.122 | 0.4225 | 8825 | 1.171 | — | 图1、2 |
杂质2 | 8.569 | 0.7069 | 8939 | 1.272 | 11.86 | ||
氧氟沙星 | 10.938 | 0.9023 | 12529 | 1.054 | 6.28 | ||
环丙沙星 | 12.122 | 1.000 | 3391 | 2.303 | 1.93 | ||
杂质i | 13.908 | 1.1473 | 6697 | 1.223 | 2.36 | ||
含量测定溶液 | 环丙沙星 | 12.478 | — | 11002 | 1.224 | — | 图3 |
有关物质供试品溶液 | 杂质1 | 5.050 | 0.4238 | 11675 | 1.036 | — | 图5、6 |
杂质2 | 8.417 | 0.7064 | 9338 | 1.321 | 12.56 | ||
环丙沙星 | 11.916 | 1.000 | 5544 | 2.048 | 7.07 |
图1.环丙沙星系统适用性溶液高效液相色谱图
图2. 环丙沙星系统适用性溶液高效液相色谱图（纵坐标局部放大）
图3. 环丙沙星含量测定溶液高效液相色谱图
图4.有关物质空白溶液（流动相a）高效液相色谱图
图5. 有关物质供试品溶液高效液相色谱图
图6. 有关物质供试品溶液高效液相色谱图（纵坐标局部放大）
结论
本实验按照中国药典2010版二部标准环丙沙星项下的检测方法，采用venusil mp c18(2)色谱柱(5 μm，110 å，4.6×250 mm)对环丙沙星进行了测定。结果表明在该方法下测得的系统适用性溶液中环丙沙星峰与氧氟沙星峰和杂质i峰的分离度分别为1.93和2.36，符合标准要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil mp c18(2) | 5 μm,110 å, 4.6×250 mm | 1支 | va952505-2 |
分析型色谱柱温箱 | 室温 5-50℃，箱内一对夹套 | 1个 | cc-100 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处样品瓶32×11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 13 mm，0.45 μm | 200片/包 | am021345 |
溶剂过滤器 | 瓶容积1000ml | 1个 | am3100 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
乙腈 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah015-4 |
应用编号：ap10049
