前言
虫草腺苷具有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效，是一种传统的名贵滋补中药材。
表1. 虫草腺苷样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
胞苷 | cytidine |
| c9h13 n3o5 | 243.22 | 65-46-3 |
尿苷 | uridine |
| c9h12 n2o6 | 244.2 | 58-96-8 |
肌苷 | inosine |
| c10h12 n4o5 | 268.23 | 58-63-9 |
鸟苷 | guanosine |
| c10h13 n5o5 | 283.24 | 118-00-3 |
β-胸苷 | thymidine |
| c10h14 n2o5 | 242.23 | 50-89-5 |
虫草素 | cordycepin |
| c10h13 n5o3 | 251.24 | 73-03-0 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
屈臣氏水；甲醇为色谱纯；
虫草腺苷样品：某厂家提供；
高效液相色谱柱：venusil mp c18(2)；5 µm，110 å，4.6 × 250 mm。
样品制备
虫草腺苷混合对照品溶液：称取虫草腺苷混合对照品适量，加流动相制成一定浓度的混合溶液；
虫草发酵样品溶液：吸取一定量样品溶液，加流动相制成一定浓度的溶液。
色谱条件
色谱柱：venusil mp c18(2)；5 µm，110 å；4.6 × 250 mm；
流动相a：水；流动相b：甲醇；
波 长：260 nm；
流 速：0.8 ml/min；
柱 温：25 ℃；
进样量：5 µl。
梯度：
时间/min | a/% | b/% |
0 | 95 | 5 |
5 | 95 | 5 |
10 | 90 | 10 |
30 | 80 | 20 |
40 | 32 | 68 |
45 | 95 | 5 |
60 | 95 | 5 |
结果与讨论
本实验采用venusil mp c18(2)色谱柱对虫草腺苷进行了测定，由表2中的数据可以得出混合对照溶液中各腺苷峰的分离效果较好，可以满足检测要求。
表2. 虫草腺苷相关样品测试结果
样品名称 | 化合物名称 | 保留时间（min） | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 | 备注 |
虫草腺苷混合对照溶液 | 胞苷 | 7.819 | 18343 | 0.98 | — | 图1 |
尿苷 | 10.728 | 20319 | 0.96 | 10.92 | ||
肌苷 | 16.244 | 72125 | 0.98 | 20.23 | ||
鸟苷 | 17.297 | 70174 | 0.97 | 4.18 | ||
β-胸苷 | 21.316 | 75996 | 0.95 | 14.07 | ||
虫草素 | 30.174 | 108136 | 0.94 | 26.15 | ||
虫草发酵样品溶液 | 尿苷 | 10.731 | 19783 | 0.86 | — | 图2 |
β-胸苷 | 21.432 | 74817 | 0.91 | 34.55 |
图1. 虫草腺苷混合对照溶液高效液相色谱图
图2.虫草发酵样品溶液高效液相色谱图
图3.虫草发酵样品中添加虫草腺苷混合对照溶液高效液相色谱图
结果与讨论
本实验采用venusil mp c18(2)色谱柱对虫草腺苷进行了测试，实验结果表明在该方法下测得的混合对照溶液中各腺苷峰之间的分离度均大于1.5，符合检测要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil mp c18(2) | 5 μm，110 å；4.6 × 250 mm | 1支 | va952505-2 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a；1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜，13 mm，0.45 μm | 100个/包 | as021345-t |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
甲醇 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah230-4 |
应用编号：ap10044
