l-精氨酸，对成人为非必需氨基酸，但体内生成速度教慢，对婴幼儿为必需氨基酸，有一定解毒作用。天然品大量存在于鱼精蛋白等中，亦为各种蛋白质的基本组成，故存在十分广泛。本实验建立一个分离方法将此氨基酸提纯。
表1. l-精氨酸样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
l-精氨酸 | l-arginine | c6h14n4o2 | 174.2 | 74-79-3 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
agela lc-50f 高压制备仪器
试剂材料
乙腈为色谱纯； 水为去离子水
高效液相色谱柱：venusil xbp c18(2) 5 μm，100 å，21.2 × 250 mm
l-精氨酸样品：客户提供
样品前处理
样品是黄色，取10 mg 样品用流动相稀释至1 ml，用0.22 μm 滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱：venusil xbp c18(2) 5 μm，100 å，21.2 × 250 mm；
流动相：a：10 mm 碳酸氢铵水溶液 b：乙腈；
检测器：205 nm
流 速：16 ml/min
进样量：30 mg
梯 度：
表2. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 16.0 | 98.0 | 2.0 |
10.0 | 16.0 | 98.0 | 2.0 |
20.0 | 16.0 | 50.0 | 50.0 |
30.0 | 16.0 | 20.0 | 80.0 |
检测条件
色谱柱：venusil xbp c18(2) 5 μm，100 å，4.6 × 250 mm；
流动相：a：10 mm 碳酸氢铵水溶液 b：乙腈；
检测器：205 nm
流 速：1 ml/min
进样量：5 μl
梯 度：
表3. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 98.0 | 2.0 |
10.0 | 1.0 | 98.0 | 2.0 |
20.0 | 1.0 | 50.0 | 50.0 |
30.0 | 1.0 | 20.0 | 80.0 |
结果与讨论
本实验采用venusil xbp c18(2) (5 μm，100 å，21.2 × 250 mm)对l-精氨酸进行了制备，由表2 及图1 可知，流动相为10 mm 碳酸氢铵水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。
图1. 制备色谱图（收集19.4 min 馏分）
图2. 制备产物检测色谱图
图3.样品检测图谱
结论
本实验采用venusil xbp c18(2) (5 μm，100 å，21.2 × 250 mm)色谱柱对l-精氨酸进行了制备。结果表明xbp c18(2)填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil xbp c18(2) | 5 µm 100 å 21.2×250 mm | 1支 | vx952520-2 |
venusil xbp c18(2) | 5 µm 100 å 4.6×250 mm | 1支 | vx952505-2 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10058
