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低聚异麦芽糖制备案例

应用简介

本实验采用cheetah® hp-100高压制备仪器结合蒸发光散射检测器(elsd)的方法,选择hilic(5 μm 100 å 20*250 mm)填料对低聚异麦芽糖进行了制备。结果表明:在蒸发光检测器下,流动相为去离子水和乙腈,进行梯度洗脱,样品能够有效分离,且峰性良好。

自然界中低聚异麦芽糖极少以游离状态存在,但作为支链淀粉或多糖的组成部分,在某些发酵食品如酱油、黄酒或酶法葡萄糖浆中有少量存在。 工业上以淀粉为原料生产低聚异麦芽糖需要一种酶,此酶为α-葡萄糖苷酶,又名葡萄糖基转移酶,简称α-糖苷酶。它能切开麦芽糖和麦芽低聚糖分子结构中α-1,6 糖苷键,并能将游离出来的一个葡萄糖残基转移到另一个葡萄糖分子或麦芽糖或麦芽三糖等分子中的α-1,6 位上,形成异麦芽糖、异麦芽三糖、异麦芽四糖、异麦芽五糖和潘糖等。

表1. 低聚异麦芽糖样品信息

样品名称

英文名

结构式

分子式

分子量

cas编号

低聚异麦芽糖

 isomaltooligosaccharide

c5h10o5n

n=2-10

300-2000

499-40-1

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

cheetah® hp-100 高压制备仪器

试剂材料

去离子水;乙腈为色谱纯;

高效液相色谱柱:hilic 5 μm 100 å 20*250 mm

低聚异麦芽糖样品:客户提供

样品溶解

取200 mg 样品用1 ml 水超生溶解,过0.22 μm 滤膜后上样。

制备条件

色谱柱:hilic 10 μm 100 å 20*250 mm;

流动相:a:去离子水 b:乙腈;

检测器:elsd(载气流量2.5ln/min,漂移管温度60℃)

流速:18 ml/min

进样量:40 mg

梯度:

表2. 液相色谱梯度洗脱条件

时间/min

流速/(ml/min)

a/%

b/%

0.0

18.0

25.0

75.0

60.0

18.0

45.0

55.0

检测条件

色谱柱:hilic 5 μm 100 å 4.6×250 mm;

流动相:a:去离子水 b:乙腈;

检测器:elsd(载气流量2.5ln/min,漂移管温度80℃)

流速:1 ml/min

进样量:20 μl

梯度:

表3. 液相色谱梯度洗脱条件

时间/min

流速/(ml/min)

a/%

b/%

0.0

1.0

25.0

75.0

50.0

1.0

50.0

50.0

结果与讨论

本实验采用hilic (5 μm 100 å 20*250 mm)对低聚异麦芽糖进行了制备,由表2 及图1 可知,流动相为去离子水与乙腈,进行梯度洗脱时,样品通过制备,峰形良好,且与附近杂质分离度较好,所得产物纯度满足客户需求。

图1.制备色谱图(收集12.8min,16.5min,21min 馏分)

图2.12.8min 馏分检测色谱图

图3.16.5min 馏分检测色谱图

图4.21min 馏分检测色谱图

图5.样品检测色谱图

结论

本实验采用hilic (5 μm 100 å 20*250 mm)色谱柱对低聚异麦芽糖进行了制备。结果表明hilic 填料对该样品分离效果良好,所得产物纯度能够满足客户要求。

附:相关产品

产品名称

规格

包装数量

订货号

hilic

10 μm 100 å 20×250 mm

1

vh902520-0

hilic

5 μm 100 å 4.6×250 mm

1

vh952505-0

1.5 ml样品瓶

短螺纹透明带书写处

32×11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5ml样品瓶盖

9    mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫

45°shore a; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

一次性注射器

2 ml无针头

100/

lzsq-2ml

液相进样针

20 µl,平头

1/

jyz-20ul

乙腈

4 l/瓶,uv

4*4 l/

ah015-4

针筒过滤器

0.22 μm 13 mm 单膜

200/

as011320

应用编号:pp10019

  • venusil hilic

    venusil hilic 色谱柱,键合相为中性的酰胺基团。在处理强极性化合物方面,venusil hilic 色谱柱比反相c18 色谱柱表现出更大的优势,利用亲水作用色谱原理,可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。

  • nd9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:agilent thermo scientific varian waters etc.

  • hplc 过滤专用一次性注射器

    专业医用注射器厂家生产;节约成本;无需按医疗废弃物处理。

  • 尼龙(nylon通用)

    广泛的化学相容性(避强酸),良好的柔韧性 ,与大多数试剂相容,低蛋白吸附。 应用于电子、微电子、半导体工业水过滤;药液、饮料、高纯化学品的过滤

资料名称 资料形式 时间
产品资料 2016年06月29日
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