样品中是一自由碱类盐酸盐，属小分子合成产物。样品中含有较多未知强杂质。需要建立一个合适的分离方法来制备纯品。
表1.样品信息
结构式 | 分子式 | 分子量 |
 | c18h38clno5 | 383.95 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
agela lc-10f 高压半制备仪器
试剂材料
乙腈为色谱纯；屈臣氏蒸馏水
制备色谱柱：innoval ods-2 10 μm，100 å，10×250 mm
自由碱样品：客户提供
样品前处理
样品是淡黄色粉末，取100 mg 样品用甲醇稀释至1 ml，用0.22 μm 滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱：innoval ods-2 10 μm，100 å，10×250 mm；
流动相：a：0.05%tfa 水溶液 b ：乙腈；
检测器：elsd 65 ℃
流 速： 4.0 ml/min
进样量：10 mg
表2. 高压制备色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 4.0 | 90.0 | 10.0 |
30.0 | 4.0 | 10.0 | 90.0 |
检测条件
色谱柱：innoval ods-2 5 μm，100 å，4.6 × 250 mm；
流动相：a：0.05%tfa 水溶液 b ：乙腈；
检测器：elsd 65 ℃
流速：1 ml/min
进样量：20 μl
表3. 液相检测梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 4.0 | 90.0 | 10.0 |
30.0 | 4.0 | 10.0 | 90.0 |
结果与讨论
本实验采用innoval ods-2 10 μm，100 å，10×250 mm 对该样品进行了制备，由图1 可知，流动相为0.05%tfa 水溶液和乙腈，进行梯等度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，且与杂质分离度较好，所得产物纯度满足客户求。
图1. 制备色谱图（收集12 min 处峰）
图2. 接收液检测色谱图
结论
本实验采用innoval ods-2 10 μm，100 å，10×250 mm 半制备柱对该自由碱类样品进行了制备。结果表明innoval ods-2 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
innoval ods-2 | 10 µm 100 å 10×250 mm | 1支 | ix902510-2 |
innoval ods-2 | 5 µm 100 å 4.6 × 250 mm | 1支 | ix952505-2 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10042
