主原植物是铁线莲属的一种植物，样品主要成分是皂苷类，以齐墩果酸为对照品，经比色法检测，其中总皂苷约有70%。样品前处理流程：中药材打粉，以70%乙醇加热回流提取3 次，回收提取液至一定浓度后，过d101 大孔树脂，收集70%乙醇洗脱的馏分，回收旋干即得样品。实验目标是经过中压制备得到纯度95%以上的单体化合物。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
cheetah mp200 中压制备仪器
试剂材料
三氟乙酸、乙腈为色谱纯； 水为去离子水
中压色谱柱：flash c18 20-35 μm，100 å，12 g
提取物样品：客户提供
样品前处理
样品是棕黄色粉末，取20 mg 样品用流动相稀释至1 ml，用0.22 μm 滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱：flash c18 20-35 μm，100 å，12 g 三支串联；
流动相：a：0.01%三氟乙酸水溶液 b：乙腈；
检测器：205 nm
流 速：15 ml/min
进样量：50 mg
梯 度：
表1. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 15.0 | 60.0 | 40.0 |
10.0 | 15.0 | 60.0 | 40.0 |
15.0 | 15.0 | 50.0 | 50.0 |
18.0 | 15.0 | 40.0 | 60.0 |
33.0 | 15.0 | 10.0 | 90.0 |
53.0 | 15.0 | 10.0 | 90.0 |
检测条件
色谱柱：venusil xbp c18 5 μm，100 å，4.6 × 250 mm；
流动相： 0.01%三氟乙酸水溶液：乙腈=73：27
检测器：205 nm
流 速：1 ml/min
进样量：5 μl
结果与讨论
本实验采用flash c18(20-35 μm，100 å，12 g)对铁线莲属植物提取物进行了制备，由表1 及图1 可知，流动相为0.01%三氟乙酸水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。
图1. 制备色谱图（收集32.3 min 和39 min 馏分）
图2. 32.3 min 制备产物检测色谱图
图3.39 min 制备产物图谱
图4.空白对照图谱
结论
本实验采用flash c18 (20-35 μm，100 å，12 g)色谱柱对铁线莲属植物提取物进行了制备。结果表明flash c18 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
flash c18 | 20-35 µm 100 å 12 g | 1支 | so230012-0 |
venusil xbp c18 | 5 µm 100 å 4.6 × 250 mm | 1支 | vx952505-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10060
