西他沙星是一种喹诺酮类广谱抗菌药，由日本第一制药三共株式会社研发成功，因分子结构中含有一个顺式氟环丙胺基团，而具有良好的药代动力学特性，并可以减轻不良反应，其体外抗菌活性较大多数同类药物明显增强。需要建立一个分离方法将其中杂质分离做结构确证。
表1. 西他沙星信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
西他沙星 | sitafloxacin hydrate |  | c16h16n3o3f | 317.12 | 163253-35-8 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
cheetah hp100 高压制备仪器
试剂材料
三氟乙酸、乙腈为色谱纯； 水为去离子水
高效液相色谱柱：venusil xbp c18(l) 5 μm，150 å，30 × 150 mm
西他沙星样品：客户提供
样品前处理
样品棕色液体底部有黑色油状物，直接冻干得到棕色粉末。粉末用乙腈：水1:1溶解成浓度40 mg/ml溶液，过0.22 μm滤膜过滤后进样
制备条件
色谱柱：venusil xbp c18(l) 5 μm，150 å，30 × 150 mm；
流动相：a：0.05%三氟乙酸水溶液 b：乙腈；
检测器：295 nm
流 速：35 ml/min
进样量：200 mg
梯 度：
表2. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 35.0 | 90.0 | 10.0 |
30.0 | 35.0 | 65.0 | 35.0 |
检测条件
色谱柱：venusil xbp c18(l) 5 μm，150 å，4.6 × 250 mm；
流动相：a：0.05%三氟乙酸水溶液 b：乙腈；
检测器：295 nm
流 速：1 ml/min
进样量：5 μl
梯 度：
表3. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 90.0 | 10.0 |
30.0 | 1.0 | 40.0 | 60.0 |
结果与讨论
本实验采用venusil xbp c18(l) (5 μm，150 å，30 × 150 mm)对西他沙星杂质进行了制备，由表2 及图1 可知，流动相为0.05%三氟乙酸水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。
图1. 制备色谱图（收集15.7 min 馏分）
图2. 制备产物检测色谱图
图3.制备产物ms 图谱
结论
本实验采用venusil xbp c18(l) (5 μm，150 å，30 × 150 mm)色谱柱对西他沙星杂质进行了制备。结果表明xbp c18(l)填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil xbp c18(l) | 5 µm 150 å 30×150 mm | 1支 | vx951530-l |
venusil xbp c18(l) | 5 µm 150 å 4.6×250 mm | 1支 | vx952505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10065
