吲哚美辛与布洛芬均为非甾体抗炎药，布洛芬临床广泛用于治疗神经痛、牙痛、痛经、关节痛及感冒综合症等，吲哚美辛用于风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肿瘤止痛及肿瘤血液病退热。本应用开发血浆中吲哚美辛及布洛芬检测前处理方法，为临床合理用药及药代动力学研究提供依据。
目标物信息
材料及仪器
cleanert pep 96微孔板（5 mg/ml），96孔正压装置；96孔收集板；venusil xbp c18(a)（2.1*150 mm，5 μm，120 å）；api 4000 。
样品处理方法
样品预处理
取50 μl血浆与50 μl 2%甲酸水溶液混合，涡旋震荡1 min，混合均匀，待净化。
净化过程
活化：200 μl 甲醇，200 μl水；
上样：将待净化液全部上样；
淋洗：加入200 μl 甲醇/水溶液（5/95, v/v）；
洗脱：100 μl 乙腈，收集洗脱液并进样检测。
仪器检测条件
hplc条件
色谱柱：venusil xbp c18(a)（2.1*150 mm，5 μm，120 å）
流速：200 μl/min
柱温：30 ℃
进样量：3 μl
流动相：乙腈/水（75/25，v/v）
质谱条件
扫描模式：电喷雾电离负模式
采集模式：多反应监测（mrm）
表1 参数信息
化合物 | 保留时间/min | q1 | q3 | dp | ce |
吲哚美辛 | 3.11 | 356.0 | 312* | -65 | -14 |
296.7 | -65 | -25 | |||
270.1 | -65 | -23 | |||
布洛芬 | 3.40 | 205.2 | 160.6* | -60 | -10 |
159.1 | -65 | -9.6 |
注：加*为定量离子
结果
图3 吲哚美辛与布洛芬标准溶液色谱图（浓度为10 ng/ml）
图4 血浆加标样色谱图（加标浓度为10 ng/ml）
图5 血浆样品色谱图
表2 回收率数据及lod
化合物 | 加标浓度 | 平均回收率 (%) | rsd (n=5, %) | lod (ng/ml) |
吲哚美辛 | 5 ng/ml | 87.80% | 2.60% | 0.5 |
20 ng/ml | 97.70% | 3.90% | ||
50 ng/ml | 95.20% | 4.70% | ||
布洛芬 | 5 ng/ml | 100.80% | 2.90% | 1.0 |
2 0ng/ml | 98.20% | 4.90% | ||
50 ng/ml | 96.22% | 3.10% |
结论：
本实验使用96孔微孔板提取测试了血浆中的吲哚美辛和布洛芬含量。浓度从5 ng/ml到50 ng/ml时回收率大于85%，rsd小于5%，使用96孔板和相关的正压装置，提高了样品处理的速度和一致性，可满足相关检测的需求。
订货信息表
产品名称 | 规格/包装 | 订货号 |
cleanert pep 96微孔板 | 96微孔板，5 mg/1ml | pe00501-mw |
cleanert m96 生物样品前处理仪 | 与96孔板匹配 | spe-m96 |
96位接收板 | 2ml/well，与96孔板匹配 | 96sp2036-2 |
venusil xbp c18 | 2.1*150 mm, 5 μm,120 å | vx951502-a |
甲醇 | hplc, 4*4l | ah230-4 |
乙腈 | hplc, 4*4l | ah015-4 |
水 | lc-ms级，4*2.5l/箱 | lc365 |
1.5ml棕色进样样品瓶 | 100/pk | 1109-0520 |
进样样品瓶瓶盖 | 100/pk | 0915-1819 |
200μl内插管 | 100/pk | 0609-0357 |
应用编号：yb10006
