替米沙坦是一种新型的降血压药物，是一种新型的口服非肽类血管紧张素ⅱ受体拮抗剂，该产品已广泛应用于临床治疗。本应用采用固液萃取法，建立了血浆中替米沙坦的萃取净化方法，可准确测定出血浆中替米沙坦的浓度，为临床用药提供依据。
目标物信息
图1 替米沙坦结构图
材料及仪器
cleanert sle 96深孔板（600 mg/3ml）；96孔氮吹仪；96孔板正压装置；96孔收集板；venusil xbp c18(a)（2.1*150 mm，5 μm，120 å）；api 4000 。
样品处理方法
样品预处理
取300 μl血浆样品与300 μl 2%甲酸水溶液进行混合稀释，涡旋1 min，混合均匀。
净化过程
上样：将600 μl混合的预处理液加入96孔板，静止5-10 min；
洗脱：3次加入2 ml共6ml甲基叔丁基醚进行目标物洗脱，依靠重力进行洗脱操作，每次洗脱后等待2-5 min使得萃取更充分。
浓缩：将洗脱液在35℃下氮吹干，使用300 μl乙腈/水（60/40，v/v）进行重定容，进样检测。
仪器检测条件
hplc条件
色谱柱：venusil xbp c18(a)（2.1*150 mm, 5 μm, 120 å）
流速：200 μl/min
柱温：30 ℃
进样量：3 μl
流动相：乙腈/水（65/35，v/v）
质谱条件
扫描模式：电喷雾电离正模式
采集模式：多反应监测（mrm）
表1 参数信息
化合物 | q1 | q3 | dp | ce |
替米沙坦 | 516.2 | 306.3 | 126 | 50 |
276.2* | 132 | 66 | ||
211.1 | 130 | 57 |
注：加*号为定量离子
结果
图2 替米沙坦标准溶液色谱图（10 ng/ml）
图3 血浆加标样色谱图（加标浓度为10 ng/ml）
图4 血浆样品色谱图
表2 加标回收率及lod
加标浓度 (ng/ml) | 平均回收率 (n=5，%) | rsd (n=5，%) | lod (ng/ml) |
2 | 87.6 | 4.36% | 0.1 |
10 | 92.7 | 3.21% | |
1000 | 94.9 | 3.18% |
结论
本实验使用cleanert sle 96孔板萃取了血浆中的替米沙坦。浓度范围为2 ng/ml到1000 ng/ml，回收率大于87%，rsd小于5%，可以满足临床研究检测替米沙坦的需要。
订货信息表
产品名称 | 规格/包装 | 订货号 |
cleanert sle | 96深孔板，600mg/3ml | hc6003q-7dw |
96孔氮气浓缩仪 | 与96孔板匹配 | nv96-g |
96位接收板 | 2ml/well，与96孔板匹配 | 96sp2036-2 |
venusil xbp c18(a) | 2.1*150mm,5μm,120 å | vx951502-a |
乙腈 | hplc, 4*4l | ah015-4 |
水 | lc-ms级，4*2.5l/箱 | lc365 |
产品名称 | 规格/包装 | 订货号 |
cleanert sle | 96深孔板，600mg/3ml | hc6003q-7dw |
96孔板负压装置 | 与96孔板匹配 | vm96 |
cleanert m96 生物样品前处理仪 | 与96孔板匹配 | spe-m96 |
96孔氮气浓缩仪 | 与96孔板匹配 | nv96-g |
96位接收板 | 2ml/well，与96孔板匹配 | 96sp2036-2 |
venusil xbp c18(a) | 2.1*150mm，5μm,120 å | vx951502-a |
乙腈 | hplc, 4*4l | ah015-4 |
水 | lc-ms级，4*2.5l/箱 | lc365 |
应用编号：yb10009
