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5种核苷酸分析实验报告

应用简介

本实验采用高效液相色谱法结合紫外检测器,选择venusil mp c18(2) 色谱柱(5 μm,110å,4.6×250 mm)对cmp、imp、amp、ump和gmp等5种核苷酸进行测试。结果表明:在波长为257 nm,流动相为0.1%高氯酸水溶液,流速为1.0ml/min,柱温为30℃时测得的对照溶液中各核苷酸峰间分离度均大于1.5,符合实验要求。

cmp、imp、amp、ump和gmp等5种核苷酸,相互补充,各尽其职,为人体所需的全部核苷酸。这5种核苷酸添加到食品(如乳制品)中,易于吸收,具有促进血液循环、改善脑机能、促进新陈代谢、抗疲劳、抗辐射、增强体制和提高免疫力等作用。

表1. 5种核苷酸相关信息

样品名称

英文简称

结构式

分子式

分子量

cas

胞嘧啶核苷酸

cmp

c9h14n3o8p

323.20

63-37-6

次黄嘌呤核苷酸

imp

c10h13n4o8p

348.21

131-99-7

腺嘌呤核苷酸

amp

c10h14n5o7p

347.22

61-19-8

尿嘧啶核苷酸

ump

c9h13n2o9p

324.18

58-97-9

鸟嘌呤核苷酸

gmp

c10h14n5o8p

363.22

85-32-5

实验部分

试剂与材料

试剂材料

实验用水为屈臣氏蒸馏水;高氯酸为分析纯试剂;

5种核苷酸混合对照品溶液:无色透明液体,由某食品公司提供;

高效液相色谱柱:venusil® mp c18(2);5 μm,110 å,4.6×250 mm。

色谱条件

色谱柱:venusil® mp c18(2);5 μm,110 å,4.6×250 mm;

流动相:0.1%高氯酸水溶液;

流  速:1.0 ml/min;

波  长:257nm;

柱  温:30℃;

进样量:10 µl。

结果与讨论

本实验采用venusil® mp c18(2)色谱柱对5种核苷酸混合对照品溶液进行了测试。由表2及下图可知,以0.1%高氯酸水溶液为流动相时,对照品溶液中各核苷酸峰间分离良好。

表2. 5种核苷酸混合对照溶液测试结果

色谱峰序号

化合物名称(简称)

保留时间/min

理论塔板数

分离度

1

cmp

8.689

16377

2

imp

10.872

15331

7.0

3

amp

17.233

16406

14.28

4

ump

19.406

16721

3.81

5

gmp

24.047

16800

6.90

venusil® mp c18(2)色谱柱用于5种核苷酸混合对照溶液分析的高效液相色谱图

结论

本实验采用venusil® mp c18(2)色谱柱(5 μm,110 å,4.6×250 mm)对5种核苷酸混合对照溶液进行测试,测得对照品溶液中各核苷酸峰间的分离度均大于1.5,满足实验要求。

附:相关产品

产品名称

规格描述

包装数量

订货号

venusil® mp c18(2)

5 μm,110 å, 4.6×250 mm

1

va952505-2

1.5 ml样品瓶

短螺纹透明带书写处

32×11.6 mm

100/pk

1109-0519

1.5ml样品瓶盖

9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫

45°shore a; 1.0 mm

100/pk

0915-1819

微孔滤膜

单膜,13 mm0.45   μm

100/

as021345-t

一次性注射器

2 ml无针头

100/

lzsq-2ml

应用编号:ab10006


  • venusil mp c18(2)

    venusil mp c18(2) 是在畅销的维纳斯一代(venusil mp c18) 的基础上,精心优化填料性质,采用新型的键合工艺升级而来的一款通用型反相色谱柱。它完美平衡了亲水能力、反相保留能力、分离能力、耐污染能力的关系,为极性范围大的混合物样品提供了均衡的保留能力,对碱性化合物具有对称的峰型,因而具有较为通用的适用能力。该款色谱柱可足大部分的色谱分析需求,免除色谱柱选型的困扰,同时受流动相ph 值、缓冲盐浓度的变化影响较小,可增加色谱行为

  • nd9(广口)

    广口短螺纹样品瓶 适配:agilent thermo scientific varian waters etc.

  • 尼龙过滤膜(nylon通用)

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  • hplc 过滤专用一次性注射器

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资料名称 资料形式 时间
技术方案 2016年03月16日
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