前言
人参可用于愈后恢复、增强体力、调节荷尔蒙、降低血糖和控制血压、控制肝指数和肝功能保健等多方面。人参皂苷是人参中的有效成分,它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效,所以人参对治疗神经系统、心血管系统、内分泌系统及生殖系统的多种疾病有很好的治疗作用。
表1.人参皂苷样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
人参皂苷rg1 | ginsenoside rg1 | c42h72o14 | 801.01 | 22427-39-0 | |
人参皂苷re | ginsenoside re | — | — | — | 51542-56-4 |
人参皂苷rb1 | ginsenoside rb1 | c54h92o23 | 1109.29 | 41753-43-9 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪,紫外检测器;
试剂材料
屈臣氏水;乙腈为色谱纯;
人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rb1混标:由某生物医药公司提供;
1号人参供试品溶液、2号人参供试品溶液:由某生物医药公司提供;
高效液相色谱柱:venusil® xbp c18(l);5 μm,150 å;4.6 × 250 mm;
色谱条件
色谱柱:venusil® xbp c18(l);5 μm,150 å;4.6 × 250 mm;
流动相a:水;
流动相b:乙腈;
波 长:203 nm;
流 速:1.0 ml/min;
柱 温:30℃;
进样量:10 µl;
梯度程序: 表2.梯度洗脱程序
时间/min | 流动相a/% | 流动相b/% |
0 | 81 | 19 |
35 | 81 | 19 |
55 | 71 | 29 |
70 | 71 | 29 |
100 | 60 | 40 |
100.1 | 81 | 19 |
110 | 81 | 19 |
结果与讨论
本实验按照ch.p2015版一部人参项下方法,使用venusil® xbp c18(l)色谱柱对人参中人参皂苷进行检测,由表3及图可知,在上述色谱条件下,理论塔板数(以人参皂苷rg1计)大于6000,三种皂苷可实现完全分离;人参供试品溶液中三种皂苷可与相邻杂质完全分离,无基质干扰。
表3.人参样品分析结果
样品名称 | 化合物名称 | 保留时间/min | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 | 备注 |
人参皂苷混标 | 人参皂苷rg1 | 41.114 | 29866 | 0.91 | — | 图1 |
人参皂苷re | 43.333 | 64188 | 0.90 | 2.71 | ||
人参皂苷rb1 | 78.651 | 309800 | 0.77 | 56.45 | ||
3号人参供试品溶液 | 人参皂苷rg1 | 40.725 | 23399 | 0.90 | — | 图2 |
人参皂苷re | 43.078 | 54755 | 0.89 | 2.61 | ||
未知杂质1 | 76.966 | 78480 | — | 36.87 | ||
人参皂苷rb1 | 78.639 | 296375 | 0.74 | 1.99 | ||
4号人参供试品溶液 | 人参皂苷rg1 | 40.914 | 26047 | 0.89 | — | 图3 |
人参皂苷re | 43.195 | 56774 | 0.92 | 2.62 | ||
未知杂质1 | 76.958 | 262822 | — | 50.86 | ||
人参皂苷rb1 | 78.546 | 326930 | 0.83 | 2.76 |
图1. venusil® xbp c18(l)色谱柱人参皂苷混标高效液相色谱图
图2. venusil® xbp c18(l)色谱柱1号人参供试品溶液高效液相色谱图
图3. venusil® xbp c18(l)色谱柱2号人参供试品溶液高效液相色谱图
结论
本实验按照ch.p2015版一部人参项下方法,使用venusil® xbp c18(l)色谱柱对人参供试品中3种人参皂苷进行检测,结果表明在上述实验条件下,理论塔板数以人参皂苷rg1计满足药典要求(n>6000),与相邻杂质可实现有效分离 (rs≥1.5),供试品溶液检测无基质干扰,venusil xbp c18(l)色谱柱可用于人参中人参皂苷的分离分析。
附:相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil® xbp c18(l) | 5 μm,150 å;4.6 × 250 mm | 1支 | vx952505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a;1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜,13 mm,0.45 μm | 100个/包 | as021345-t |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
应用编号:ap10247