前言
三七为我国传统名贵中药材,自古就有“止血神药”的美称,主要有止血、抗血栓、促进造血、抗炎、保肝和抗肿瘤等多重作用。三七最主要的活性成分为三七总皂苷,具有抑制血小板聚集和增加脑血流量的作用,可用于活血祛瘀,通脉活络。
表1.三七总皂苷样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
三七皂苷r1 | notoginsenoside r1 | c47h80o18 | 933.131 | 80418-24-2 | |
人参皂苷rg1 | ginsenoside rg1 | c42h72o14 | 801.01 | 22427-39-0 | |
人参皂苷re | ginsenoside re | — | — | — | 51542-56-4 |
人参皂苷rb1 | ginsenoside rb1 | c54h92o23 | 1109.29 | 41753-43-9 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪,紫外检测器;
试剂材料
屈臣氏水;乙腈为色谱纯;
三七皂苷r1、人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rb1混标:由某生物医药公司提供;
高效液相色谱柱:venusil® xbp c18(l);5 μm,150 å;4.6 × 250 mm;
色谱条件
色谱柱:venusil® xbp c18(l);5 μm,150 å;4.6 × 250 mm;
流动相a:水;
流动相b:乙腈;
波 长:203 nm;
流 速:1.0 ml/min;
柱 温:30℃;
进样量:10 µl;
梯度程序: 表2.梯度洗脱程序
时间/min | 流动相a/% | 流动相b/% |
0 | 81 | 19 |
12 | 81 | 19 |
60 | 64 | 36 |
60.1 | 81 | 19 |
70 | 81 | 19 |
结果与讨论
本实验按照ch.p2015版一部三七项下方法,使用venusil® xbp c18(l)色谱柱对三七总皂苷混合标准溶液进行检测,由表3及图可知,在上述色谱条件下,理论塔板数(以三七皂苷r1计)大于4000,四种皂苷可实现完全分离。
表3.三七总皂苷混合标准溶液分析结果
样品名称 | 化合物名称 | 保留时间/min | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 |
三七中皂苷混标 | 三七皂苷r1 | 23.709 | 67039 | 0.94 | — |
人参皂苷rg1 | 27.526 | 102824 | 0.94 | 10.74 | |
人参皂苷re | 28.166 | 116445 | 0.95 | 1.90 | |
人参皂苷rb1 | 54.261 | 436824 | 0.80 | 79.13 |
图1. venusil® xbp c18(l)色谱柱三七中皂苷混标高效液相色谱图
结论
本实验按照ch.p2015版一部三七项下方法,使用venusil® xbp c18(l)色谱柱对三七总皂苷混合标准溶液进行检测,结果表明在上述实验条件下,理论塔板数以三七皂苷r1计满足药典要求(n>4000),4种皂苷可实现完全分离 (rs≥1.5), venusil xbp c18(l)色谱柱可用于三七总皂苷混合标准溶液的分离分析。
附:相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil® xbp c18(l) | 5 μm,150 å;4.6 × 250 mm | 1支 | vx952505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a;1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜,13 mm,0.45 μm | 100个/包 | as021345-t |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
应用编号:ap10246