样品前处理方法
准确量取5 ml尿样与50 ml离心管内，加入0.5 ml 2mol/l的乙酸铵缓冲液（ph=5.2），加入40μl葡萄糖醛苷酶和芳基硫酸酯酶，漩涡混匀，37℃避光水浴震荡16h。10000rpm离心10min，取上清液与另一50 ml离心管内，用5mol/lnaoh 调节ph值9.8，加入10 ml异丙醇-乙酸乙酯，加入约2g固体氯化钠，漩涡震荡10min，5000rpm离心10min。以10 ml异丙醇-乙酸乙酯再次提取，合并两次上清液，50℃旋转蒸干，以5 ml 2mol/l乙酸铵溶液溶解，备用。取备用液过pcx（60 mg/3 ml，p/n: cx0603）柱以5 ml5%氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液在50℃下氮气吹干。用1 ml0.2%甲酸水溶液溶解，待测，过0.22 μm滤膜过滤，待测。
色谱条件
流动相：a：含5 mm甲酸铵和0.1%甲酸水溶液b：乙腈
色谱柱：
venusil® mp c18，3.0×50 mm，2.6 μm（p/n: va930503-0）
柱温：40℃
梯度时间表
时间 (min) | 流速 (µl/min) | a (%) | b (%) |
0 | 600 | 95 | 5 |
1 | 600 | 95 | 5 |
4.5 | 600 | 50 | 50 |
5 | 600 | 5 | 95 |
6.5 | 600 | 5 | 95 |
6.6 | 600 | 95 | 5 |
6.8 | 600 | 95 | 5 |
质谱条件
离子源：具备电喷雾接口的turbo v™离子源
极性：正离子模式，离子源相关参数如下：
cur: 35.00
tem: 700.00
gs1: 60.00
gs2: 55.00
is: 5500.00
化合物离子对信息
名称 | q1 (amu) | q3 (amu) | ce (ev) |
莱克多巴胺 | 302.1 | 164.2 | 22 |
107.1 | 49 | ||
克伦特罗 | 277 | 132.1 | 38 |
203.1 | 24 | ||
沙丁胺醇 | 240.1 | 148.1 | 23 |
166.2 | 17 | ||
马布特罗 | 311 | 237 | 23 |
217 | 34 | ||
氯丙那林 | 214.1 | 154.1 | 23 |
118.1 | 34 | ||
西布特罗 | 234 | 160.1 | 20 |
143.2 | 35 | ||
班布特罗 | 368.2 | 294.1 | 27 |
72.1 | 64 | ||
溴布特罗 | 367 | 292.9 | 25 |
348.9 | 17 | ||
克伦普罗 | 263.1 | 132.1 | 17 |
245.1 | 38 | ||
马喷特罗 | 325.2 | 237 | 25 |
217 | 37 | ||
羟甲基克伦特罗 | 293.1 | 203 | 25 |
275 | 17 | ||
福马特洛 |
345.1 | 149.3 | 28 |
121.2 | 38 | ||
克伦潘特 |
291.1 | 188.1 | 30 |
217.1 | 25 | ||
苯乙醇胺 |
345.1 | 327.2 | 19 |
150.1 | 30 |
结论
本方法基于国家标准《猪尿中β-受体激动剂多残留检测 液相色谱-串联质谱法（农业部1025号公告-11-2008）》和农业行业标准《动物尿液中11中β-受体激动剂的检测（农业部1063号公告-3-2008）》，使用lc-ms/ms法测定动物源食品中多种β-受体激动剂残留的测定。经验证，适用于sciex triple quad 3500, 3200,4000系列， 4500系列、api 5000 、5500系列以及6500系列的lc-ms/ms系统。方法灵敏度高，重现性好，适用于日常分析。
