样品前处理方法
准确称取蜂蜜试样（5.00±0.01g），置于50 ml具塞离心管中，加入15 ml 0.1 mol/l na2co3/nahco3 (ph 9.3) 缓冲溶液,于液体混匀器上快速混合1 min，使试样完全溶解。将混合液倒入下接cleanert® pep-2 (60 mg/3 ml, p/ n: pe0603-2)的贮液器中，溶液以≤2 ml/min的流速通过cleanert® pep-2 (60 mg/3 ml, p/n: pe0603-2).待溶液完全流出后，用5 ml水洗离心管和贮液管并过柱，再用5 ml甲醇＋水（甲醇∶水＝4∶6）洗柱，弃去全部淋出液，抽干， 用5 ml甲醇洗脱。收集洗脱液于50 ℃下用氮气吹干，甲醇＋水（甲醇∶水＝3∶7）定容至1.0 ml，过0.45 μm的滤膜到进样瓶中，供液相色谱/质谱仪测定。
色谱条件
流动相：a: 水(0.1% 甲酸)，b: 甲醇
色谱柱：venusil® mp c18，2.1×50 mm，3 μm (p/n: va931502-0)
柱 温 ：40 ℃
梯度洗脱
梯度时间表
时间 (min) | 流速 (µl/min) | a (%) | b (%) |
0 | 250 | 80 | 20 |
3 | 250 | 40 | 60 |
4 | 250 | 40 | 60 |
8 | 250 | 10 | 90 |
11 | 250 | 10 | 90 |
11.1 | 250 | 80 | 20 |
13 | 250 | 80 | 20 |
质谱条件
离子源: 具备电喷雾接口的turbo v™离子源极性: 正离子模式，离子源相关参数如下：
cur: 20.0
tem: 450.0
gs1: 60.0
gs2: 60.0
is: 5500.0
蜂蜜中大环内酯类物质的离子对信息
名称 | q1 (amu) | q3 (amu) |
红霉素 | 734.2 | 158 |
576 | ||
罗红霉素 | 837.5 | 158 |
679.1 | ||
替米卡星 | 869.5 | 174 |
696.3 | ||
泰乐菌素 | 916.5 | 174 |
772.1 | ||
交沙霉素 | 828.4 | 174 |
645.2 | ||
竹桃霉素 | 688.3 | 158 |
544 | ||
螺旋霉素i |
843.5 | 174 |
540.1 | ||
北里霉素 | 772.2 | 174 |
108 |
总结
该方法基于(gb/t 23409-2008) ，使用lc-ms/ms法进行蜂蜜中大环内酯类抗生素的测定，该法简单、灵敏，特异性 强，适用于蜂蜜中大环内酯类药物残留的分析确证。并且通 过验证可用于各种蜂产品基质中大环内酯类的定量、定性分 析。数据库经验证适用于sciex triple quad 4000系列、4500系 列、api 5000 、5500系列以及6500系列的lc-ms/ms系统。
