邻苯二甲酸酯类是指邻苯二甲酸（phthalate acid） 的酯化衍生物，是塑胶工业中最为常见的塑化剂。在日常及工业上被广泛添加于高分子塑胶产品的生产，如聚氯乙烯（pvc）、聚丙烯（pp）、泡棉，亦可添加于胶合剂、涂料、油墨中。此外应用于地毯衬垫、驱虫剂、头发喷雾剂、指甲油与火箭燃料等，对人类健康有严重危害。人们对儿童用品中的邻苯二甲酸酯最为重视。欧盟于1999年就正式作出决定，在欧盟成员国内，对3岁以下儿童使用的与口接触的玩具(如婴儿奶嘴)以及其他儿童用品中邻苯二甲酸酯的含量进行严格限制。2005 年12 月27 日，欧盟发布新的指令2005/84/ec要求：所有玩具及育儿物品中，dehp、dbp 及bbp 的含量不得超过0.1%，所有可以放入儿童嘴中的玩具及育儿物品，dinp、didp 及dnop 的含量不得超过0.1%。
实验材料
主要仪器设备
agilent气相色谱串连质谱仪。
试剂材料
乙腈、二氯甲烷均为色谱纯；正己烷为农残级；30%二氯甲烷/正己烷溶液：量取30 ml二氯甲烷，用正己烷稀释至100 ml。
16种邻苯二甲酸酯标准品（纯度99%）：正己烷溶解；
cleanert® psa玻璃柱：1 g/6 ml。
样品制备
样品提取
方法一：称取花生油样品1 g于40 ml玻璃样品瓶中，加入2 ml正己烷，10 ml乙腈，涡旋2 min，4000 r/min离心2min，取上层清液转移至另一干净样品瓶中。剩余液体加入10 ml乙腈重复提取一次，合并两次上清液，于40℃氮吹至干，加入2 ml正己烷溶解，作为待净化液。
方法二：称取花生油样品1 g于40 ml玻璃样品瓶中，加入2 ml正己烷，10 ml乙腈，涡旋2 min，4000 r/min离心2min，取上层清液转移至另一干净样品瓶中。剩余液体加入10 ml乙腈重复提取一次，合并两次上清液，于40℃氮吹至剩余5 ml左右，作为待净化液。
样品净化
方法一：将cleanert psa玻璃柱依次用5 ml二氯甲烷，5 ml正己烷活化平衡，将上述提取方法一中的待净化液全部上样于小柱上并收集流出液，然后用5 ml正己烷清洗装上样液的样品瓶，将洗涤液全部上于小柱上，收集流出液，最后用5 ml 30%二氯甲烷/正己烷溶液洗脱小柱，合并三次流出液，于40℃下氮吹至近干，正己烷定容至1 ml，待检测。
方法二：将cleanert psa玻璃柱依次用5 ml二氯甲烷，5 ml乙腈活化平衡，将上述提取方法二中的待净化液全部上样于小柱上并收集流出液，然后用5 ml乙腈清洗装上样液的样品瓶，将洗涤液全部上于小柱上，收集流出液，合并两次流出液，于40℃下氮吹至近干，正己烷定容至1ml，待检测。
注：上述操作步骤均可在qdaura®卓睿全自动固相萃取仪上完成。
实验条件
色谱柱：da-5ms色谱柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 μm；
进样口温度：250℃；
载气：氦气，纯度≥99.999％；
流速：1 ml/min；
电离方式：ei源；
离子源温度：230℃；
溶剂延迟：7 min；
进样方式：不分流进样；
样量：1 μl；
程序升温：50℃保持1 min，以20℃/min升至220℃保持1 min，再以5℃/min升至280℃保持4 min。
表 1. 16 种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及辅助定量离子
序号 | 中文名称 | 英文缩写 | 定量离子 | 辅助定量离子 |
1 | 邻苯二甲酸二甲酯 | dmp | 163 | 163、77 |
2 | 邻苯二甲酸二乙酯 | dep | 149 | 149、177 |
3 | 邻苯二甲酸二异丁酯 | dibp | 149 | 149、223 |
4 | 邻苯二甲酸二丁酯 | dbp | 149 | 149、223 |
5 | 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 | dmep | 59 | 59、149、193 |
6 | 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 | bmpp | 149 | 149、251 |
7 | 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 | deep | 45 | 45、72 |
8 | 邻苯二甲酸二戊酯 | dpp | 149 | 149、237 |
9 | 邻苯二甲酸二己酯 | dhxp | 149 | 104、149、76 |
10 | 邻苯二甲酸丁基苄基酯 | bbp | 149 | 149、91 |
11 | 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 | dbep | 149 | 149、223 |
12 | 邻苯二甲酸二环己酯 | dchp | 149 | 149、167 |
13 | 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 | dehp | 149 | 149、167 |
14 | 邻苯二甲酸二苯酯 | — | 225 | 225、77 |
15 | 邻苯二甲酸二正辛酯 | dnop | 149 | 149、279 |
16 | 邻苯二甲酸二壬酯 | dnp | 149 | 57、149、71 |
结果与讨论
实验结果
由表2 可知，采用sn/t 3137-2012 方法处理花生油中的邻苯二甲酸酯，邻苯二甲酸二(2- 甲氧基) 乙酯和邻苯二甲酸二苯酯的回收率不能满足要求，而优化的两种前处理方法，所有目标物的回收率均能够满足要求，在70% ~ 120% 之间，方法二的回收率要比方法一的回收率稍好。
表2. 16 种邻苯二甲酸酯前处理方法加标实验结果(n=3，添加水平2 mg/kg)
峰号 |
化合物 |
简称 |
保留时间 | sn/t 3137-2012 | 方法一 | 方法二 | |||
平均回 收率/% | rsd/% | 平均回 收率/% | rsd/% | 平均回 收率/% | rsd/% | ||||
1 | 邻苯二甲酸二甲酯 | dmp | 8.347 | 71.5 | 7.7 | 95.5 | 1.4 | 75.0 | 6.2 |
2 | 邻苯二甲酸二乙酯 | dep | 9.213 | 99.3 | 8.3 | 98.7 | 1.6 | 85.6 | 4.8 |
3 | 邻苯二甲酸二异丁酯 | dibp | 11.009 | 104.9 | 2.9 | 92.5 | 2.4 | 89.9 | 4.5 |
4 | 邻苯二甲酸二丁酯 | dbp | 11.796 | 106.1 | 3.8 | 89.1 | 2.8 | 90.2 | 4.0 |
5 | 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 | dmep | 12.106 | 0.8 | 7.9 | 87.4 | 5.2 | 112.9 | 2.7 |
6 | 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 | bmpp | 12.84 | 107.0 | 3.4 | 88.8 | 2.6 | 83.3 | 1.4 |
7 | 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 | deep | 13.21 | 23.6 | 3.1 | 86.8 | 6.8 | 99.6 | 2.7 |
8 | 邻苯二甲酸二戊酯 | dpp | 13.653 | 105.1 | 4.4 | 88.8 | 2.0 | 87.6 | 2.4 |
9 | 邻苯二甲酸二己酯 | dhxp | 15.882 | 104.9 | 5.4 | 87.7 | 1.7 | 87.1 | 1.8 |
10 | 邻苯二甲酸丁基苄基酯 | bbp | 16.007 | 92.8 | 8.7 | 87.7 | 0.3 | 91.6 | 1.6 |
11 | 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 | dbep | 17.482 | 92.6 | 10.6 | 88.1 | 1.6 | 95.4 | 2.3 |
12 | 邻苯二甲酸二环己酯 | dchp | 18.16 | 104.3 | 4.3 | 87.1 | 1.6 | 87.5 | 2.1 |
13 | 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 | dehp | 18.35 | 105.4 | 9.5 | 97.8 | 3.6 | 82.9 | 4.2 |
14 | 邻苯二甲酸二苯酯 | — | 18.482 | 未检出 | 未检出 | 70.0 | 0.5 | 106.3 | 2.2 |
15 | 邻苯二甲酸二正辛酯 | dnop | 20.925 | 104.7 | 4.9 | 84.5 | 2.4 | 97.1 | 0.9 |
16 | 邻苯二甲酸二壬酯 | dnp | 21.595 97.2 | 6.8 | 103.8 | 3.4 | 116.4 | 2.8 | |
图1. 2 μg/ml 16种邻苯二甲酸酯标准溶液色谱图
图2. 花生油基质空白色谱图
图3. 花生油基质sn/t 3137-2012方法处理2 mg/kg加标色谱图
图4. 花生油基质方法一处理2 mg/kg加标色谱图
图5. 花生油基质方法二处理2 mg/kg加标色谱图
结论
本实验依据sn/t 3137-2012，优化出两种处理16种邻苯二甲酸酯的spe方法，并结合gc/ms对加标量为2 mg/kg的样品进行了测定。结果在70% ~ 120%之间，且稳定性良好。方法二的回收率要优于方法一的回收率，但是除油效果是方法一最佳。说明两种方法均可用于测定植物油中16种邻苯二甲酸酯的残留。
订货信息
名称 | 规格 | 订货号 |
cleanert® psa 玻璃柱 | 1 g/6 ml，30/pk | pa0006-g |
da-5ms | 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm | 1525-3002 |
qdaura® 卓睿全自动固相萃取仪 | 24 位，无本底 | spe-40 |
氮吹仪 | 15 位 | nv15-m |
1.5 ml 样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm，100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml 样品瓶盖 | 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶 / 米色 ptfe 隔 垫 45°shore a; 1.0 mm，100/pk | 0915-1819 |
应用编号：af10069
