前言
邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写paes，是邻苯二甲酸形成的酯的统称。当被用作塑料增塑剂时，一般指的是邻苯二甲酸与4～15个碳的醇形成的酯。邻苯二甲酸酯主要用于聚氯乙烯材料，令聚氯乙烯由硬塑胶变为有弹性的塑胶，起到增塑剂的作用。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品（如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液）等数百种产品中，但对人体的健康有严重的危害。一般人容易会在塑胶制品包装中接触到邻苯二甲酸酯类，在生活中有很多食物在加工、加热、包装、盛装的过程里可能会造成邻苯二甲酸酯的溶出且渗入食物中。含有邻苯二甲酸酯的软塑料玩具及儿童用品有可能被小孩放进口中，如果放置的时间足够长，就会导致邻苯二甲酸酯的溶出量超过安全水平，会危害儿童的肝脏和肾脏，也可引起儿童性早熟。
本文通过重现国标，建立了cleanert psa/silica固相萃取柱净化芝麻油中邻苯二甲酸酯的前处理方法。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
气相色谱串联质谱仪
试剂材料
乙腈、丙酮为色谱纯；正己烷、二氯甲烷均为农残级；
16种邻苯二甲酸酯混合标准品（纯度99%）：正己烷溶解；
cleanert psa/silica：1 g/6 ml。
样品制备
样品提取
称取均匀的芝麻油样品0.5 g，加入100 µl正己烷，2 ml乙腈，涡旋1 min，超声提取20 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液于另一干净玻璃瓶中，残渣加入2 ml乙腈，涡旋1 min，4000 r/min离心5 min，转移上清液，残渣再加入2 ml乙腈提取一次。合并3次上清液，作为待净化液。
样品净化
将cleanert psa/silica小柱依次用5 ml二氯甲烷，5 ml乙腈活化，弃去流出液。将上述待净化液上样于cleanert psa/silica小柱上，收集流出液，再用5 ml乙腈洗脱小柱，收集流出液。合并两次流出液，加入1 ml丙酮，于40℃氮吹至近干，用正己烷定容至2 ml，涡旋混匀，供气质检测。
基质混合标准工作溶液
取高浓度16种邻苯二甲酸酯混合标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成0.2 µg/ml的基质混合标准工作溶液。
注：实验中应避免使用塑料制品。
实验条件
色谱柱：da-5ms色谱柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 µm；
进样口温度：260℃；柱温：初始温度60℃，保持1 min，以20℃/min 升至220℃，保持1 min，再以5℃/ min 升至250℃ 保持1 min；再以20℃/min升温至290℃，保持7.5 min。
载气：氦气，纯度≥99.999％
流速：1 ml/min；
电离方式：ei源；
离子源温度：230℃；
溶剂延迟：7 min；
进样方式：不分流进样；
样量：1 µl；
监测方式：选择离子扫描（sim）。
表1. 16种邻苯二甲酸酯监测离子参数
物质名称 | 定性离子（m/z） | 定量离子（m/z） |
邻苯二甲酸二甲酯 dmp | 163，77，194，133 | 163 |
邻苯二甲酸二乙酯 dep | 149，177，105，222 | 149 |
邻苯二甲酸二异丁酯 dibp | 149，223，104，167 | 149 |
邻苯二甲酸二正丁酯 dbp | 149，223，205，104 | 149 |
邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯 dmep | 59，149，104，176 | 149 |
邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯 bmpp | 149，167，85，251 | 149 |
邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 deep | 72，149，104，193 | 149 |
邻苯二甲酸二戊酯 dpp | 149，237，219，104 | 149 |
邻苯二甲酸二己酯 dhxp | 149，251，104，233 | 149 |
邻苯二甲酸丁基苄基酯 bbp | 149，91，206，104 | 149 |
邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 dbep | 149，101，85，193 | 149 |
邻苯二甲酸二环己酯 dchp | 149，167，249，104 | 149 |
邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯 dehp | 149，167，279，113 | 149 |
邻苯二甲酸二苯酯 dphp | 225，77，104，153 | 225 |
邻苯二甲酸二正辛酯 dnop | 149，279，104，261 | 149 |
邻苯二甲酸二壬酯 dnp | 149，293，167，275 | 149 |
结果与讨论
实验结果
由表2可知，采用固相萃取结合gc-ms的方法检测芝麻油中的16种邻苯二甲酸酯，加标回收率在70% ~ 130%之间，能够满足标准要求。由图1、图2、图3可知，用da-5ms色谱柱检测16种邻苯二甲酸酯，峰形良好且保留时间稳定。
表2. 芝麻油中16种邻苯二甲酸酯加标回收实验结果(添加水平0.8 mg/kg)
物质名称 | 保留时间/min | 平均回收率/% | 变异系数/% |
邻苯二甲酸二甲酯 dmp | 7.911 | 99.4 | 7.3 |
邻苯二甲酸二乙酯 dep | 8.776 | 107.0 | 6.8 |
邻苯二甲酸二异丁酯 dibp | 10.603 | 115.0 | 9.3 |
邻苯二甲酸二正丁酯 dbp | 11.412 | 113.5 | 3.3 |
邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯 dmep | 11.748 | 104.8 | 8.3 |
邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯 bmpp | 12.458 | 115.4 | 2.1 |
邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯 deep | 12.872 | 115.0 | 11.2 |
邻苯二甲酸二戊酯 dpp | 13.306 | 112.6 | 3.6 |
邻苯二甲酸二己酯 dhxp | 15.57 | 105.0 | 3.5 |
邻苯二甲酸丁基苄基酯 bbp | 15.728 | 112.4 | 4.6 |
邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯 dbep | 17.289 | 127.3 | 4.1 |
邻苯二甲酸二环己酯 dchp | 17.894 | 118.9 | 4.7 |
邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯 dehp | 18.015 | 76.5 | 8.2 |
邻苯二甲酸二苯酯 dphp | 18.181 | 104.0 | 8.6 |
邻苯二甲酸二正辛酯 dnop | 19.716 | 99.8 | 4.0 |
邻苯二甲酸二壬酯 dnp | 21.591 | 93.7 | 4.3 |
图1. 0.2 µg/ml16种邻苯二甲酸酯标准色谱图
图2. 芝麻油基质空白色谱图
图3. 芝麻油基质0.8 mg/kg加标色谱图
结论
本实验重现gb5009.271-2016食品中邻苯二甲酸酯测定的国家标准，用cleanert psa/silica小柱结合气相色谱串联质谱的方法对芝麻油中的16种邻苯二甲酸酯进行了测定。由于芝麻油对目标物有基质增强效应，所以本次实验的回收率均用基质标准工作溶液进行计算。对于加标量为0.8 mg/kg的样品，加标回收率在70% ~ 130%之间，符合检测要求，且变异系数小于15%，稳定性良好。说明cleanert psa/silica小柱能够用于芝麻油中16种邻苯二甲酸酯的检测。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
cleanert psa/silica | 1 g/6 ml | 30支/包 | pae0006-g |
da-5ms | 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm | 1支 | 1525-3002 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
pae专用针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.45 µm | 200个/包 | pae041345 |
氮吹仪 | 15位 | 1台 | nv15-g |
应用编号：af10059