前言
三七总皂苷是三七提取的活性成分,主要成份包括人参皂苷rb1,人参皂苷rg1,三七皂苷r1。其药理作用主要有降低机体的耗氧量,提高机体对缺氧的耐受力;扩张脑血管,使脑血流量增加;抗血栓和抗凝血作用等。
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
屈臣氏水;乙腈为色谱纯;磷酸为色谱纯;
脑伤乐生样品:由某药品公司提供;皂苷类标准品:由某药品公司提供;
高效液相色谱柱:venusil asb c18;3 µm,150 å;4.6 × 100 mm。
样品制备
脑伤乐生样品溶液:准确量取样品0.5 ml,加水0.5 ml稀释,混匀,0.45 μm滤膜过滤,取续滤液即得;
皂苷类标准品:准确量取该标准品0.5 ml,加水0.5 ml稀释,混匀,0.45 μm滤膜过滤,取续滤液即得。
色谱条件
色谱柱:venusilr asb c18;3 µm,150 å;4.6 × 100 mm;
流 速:1.0 ml/min;
波 长:203 nm;
柱 温:30℃;
进样量:10 µl;
梯 度:
表1.梯度表
时间(min) | a%(0.1%磷酸水溶液) | b%(乙腈) |
0 | 84 | 16 |
20 | 84 | 16 |
40 | 79 | 21 |
45 | 79 | 21 |
80 | 68 | 32 |
85 | 68 | 32 |
85.1 | 84 | 16 |
95 | 84 | 16 |
结果与讨论
本实验采用venusil asb c18色谱柱对脑伤乐生中人参皂苷与三七皂苷进行了测定,由表2及图2可知,在上述色谱条件下,待测物分离效果相对较好。
表2. 脑伤乐生中皂苷类成分测试结果
样品名称 | 峰序号 | 保留时间(min) | 理论塔板数 | 分离度 |
皂苷对照品 | 1 | 42.426 | 133470 | — |
2 | 43.822 | 129461 | 2.93 | |
脑伤乐生样品 | 1 | 42.377 | 115625 | — |
2 | 43.193 | — | 1.31 | |
3 | 43.777 | 115386 | 0.95 |
图1. 皂苷类标准品高效液相色谱图
图2. 脑伤乐生样品溶液高效液相色谱图(下图为上图的横、纵坐标局部放大)
结论
本实验按客户提供的标准方法,采用venusil asb c18色谱柱(3 μm,150 å,4.6 × 100 mm)对脑伤乐生样品溶液中的皂苷类成分进行了测定。结果表明两皂苷类化合物分离效果较好,但与其周围杂质未达到基线分离。
附:相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusilr asb c18 | 3 μm,150 å,4.6 × 100 mm | 1支 | vs931005-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a;1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜,13 mm,0.45 μm | 100个/包 | as021345-t |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
乙腈 | 4 l/瓶,色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah015-4 |
应用编号:ap10084