前言
稳心颗粒是卫生部颁布的国家级三类新药。由党参、黄精、三七、琥珀、甘松等组成，是治疗心律失常的首选药物。
表1. 人参皂苷相关信息
化合物名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
三七皂苷r1 | notoginsenoside r1 |
| c47h80o18 | 933.131 | 80418-24-2 |
人参皂苷rg1 | ginsenoside rg1 |
| c42h72o14 | 801.01 | 22427-39-0 |
人参皂苷rb1 | ginsenoside rb1 |
| c54h92o23 | 1109.29 | 41753-43-9 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
屈臣氏水；乙腈、正丁醇、甲醇为色谱纯；氢氧化钠为分析纯；
稳心颗粒：山东某制药股份有限公司；
高效液相色谱柱：venusil® xbp c18(l)；5 μm，150 å；4.6×250 mm。
样品制备
供试品溶液的制备：取稳心颗粒适量，研细，称取1.0g细粉，放入250ml具塞锥形瓶中，加入50ml水饱和的正丁醇溶液，称定重量，浸泡12h后超声1h（频率40khz），放冷，再称定重量，并用水饱和的正丁醇溶液补足减少的重量，摇匀，过滤；精密量取25ml滤液，用2%的氢氧化钠溶液洗涤两次，每次30ml，弃掉碱液；之后用30ml的正丁醇饱和的水溶液洗涤滤液，弃去洗涤液；之后将正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并定容到10ml，即得。
实验条件
色谱柱：venusil® xbp c18(l)；5 μm，150 å；4.6×250 mm；
波 长：203 nm；
柱 温：25 ℃；
流 速：1.0 ml/min；
进样量：10 µl；
流动相：以乙腈为流动相a，水为流动相b，按下表中的规定进行梯度洗脱；
表2. 梯度运行程序
时间/min | 流动相a/% | 流动相b/% |
0~11 | 20→27 | 80→73 |
11~35 | 27→38 | 73→62 |
35~37 | 38→50 | 62→50 |
37~40 | 50 | 50 |
40~42 | 50→20 | 50→80 |
42~50 | 20 | 80 |
结果与讨论
本实验根据chp2015版一部稳心颗粒含量测定项下分析方法，采用venusil® xbp c18(l)色谱柱对稳心颗粒供试品溶液进行了测试，由表3及图1可知，待测物峰形良好，且与附近杂质分离度较好，满足检测要求。
表3. 稳心颗粒含量测定供试品溶液分析结果
化合物名称 | 保留时间/min | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 |
三七皂苷r1 | 13.065 | 28478 | 0.900 | — |
人参皂苷rg1 | 15.107 | 57460 | 1.314 | 7.26 |
人参皂苷rb1 | 31.876 | 267729 | 0.766 | 67.17 |
图1.稳心颗粒含量测定供试品溶液高效液相色谱图
实验结论
本实验根据chp2015一部稳心颗粒含量测定项下分析方法，采用venusil® xbp c18(l)色谱柱(5 μm，150 å，4.6×250 mm)对稳心颗粒供试品溶液进行了测试。结果表明色谱柱对含量测定供试品溶液中三七皂苷r1、人参皂苷rg1和人参皂苷rb1峰分离效果较好，理论塔板数以人参皂苷rg1峰计算为57460>2000，能够满足检测要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil® xbp c18(l) | 5 μm,150 å, 4.6×250 mm | 1支 | vx952505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32×11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜，13 mm，0.45 μm | 100个/包 | as021345 |
一次性注射器 | 1 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-1ml |
乙腈 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah015-4 |
应用编号：ap10059