前言
参照客户提供相关方法，对某皂苷样品中有关物质进行分离，建立高效液相色谱法。
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
乙腈为色谱纯；水为屈臣氏水；磷酸为分析纯；
稀释剂：乙腈︰水 = 50︰50(v/v)；
高效液相色谱柱：venusil xbp c18(l)；5 µm，150 å，4.6 × 250 mm。
样品制备
供试品：称取皂苷提取物适量，加稀释剂溶解并稀释制成每1.0 ml中含0.5 mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
色谱条件
色谱柱：venusil xbp c18(l)；5 µm，150 å，4.6 × 250 mm；
流动相a：水(含0.1%磷酸)；
流动相b：乙腈；
流 速：1.0 ml/min；
柱 温：30℃；
进样量：20 µl；
波 长：206 nm；
表1.梯度条件
时间（min） | 流动相a（%） | 流动相b（%） |
0 | 95 | 5 |
5 | 95 | 5 |
20 | 70 | 30 |
25 | 70 | 30 |
30 | 0 | 100 |
40 | 0 | 100 |
结果与讨论
本实验采用venusil xbp c18(l)色谱柱对皂苷提取物中有关物质进行了测定。由图1、2、3、4可知，venusil xbp c18(l)色谱柱对皂苷提取物中有关物质分离效果较好，能够满足要求。
图1.皂苷提取物(95%醇提)供试品溶液高效液相色谱图(下图为上图的纵坐标局部放大)
图2. 皂苷提取物(样品2)供试品溶液hplc色谱图(下图为上图的纵坐标局部放大)
结论
本实验用venusil xbp c18(l)色谱柱对皂苷提取物中有关物质进行了测定，分离效果良好，且保留时间稳定，峰形良好，说明venusilr xbp c18(l)可以用于皂苷提取物中有关物质的测定。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil xbp c18(l) | 5 µm，100 å，4.6 × 250 mm | 1支 | vx952505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a；1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
尼龙针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.45 µm | 100个/包 | as021345 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
甲醇 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah230-4 |
乙腈 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah015-4 |
应用编号：ap10076