前言
维格列汀是一种具有选择性、竞争性、可逆的dpp24抑制剂。是二肽基肽酶抑制剂的一个代表药物，在临床研究中无论单独用药还是联合二甲双胍和胰岛素用药，均显示了良好的抗糖尿病作用以及耐受性。
本实验采用高效液相色谱法结合紫外检测器对维格列汀分离度试验溶液进行测试，以期为维格列汀的分析提供参考方法。
表1.维格列汀化学信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
维格列汀 | vildagliptin |
| c17h25n3o2 | 303.4 | 274901-16-5 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
屈臣氏水；无水磷酸二氢钾、无水磷酸氢二钾、乙腈、甲醇均为色谱纯试剂；盐酸为分析纯试剂；
维格列汀分离度试验溶液：无色透明液体，由某医药公司提供；
磷酸盐缓冲液：取无水磷酸二氢钾1.3g，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，用磷酸氢二钾溶液调节ph值至6.5；
磷酸氢二钾溶液：取无水磷酸氢二钾1.5g，加水10ml使溶解；
高效液相色谱柱：
venusil® c18 plus；5 μm，120å；4.6 × 50mm；
venusil® xbp c18(l)；3 μm，150å；4.6 × 50mm；
durashell c18(l)；3 μm，150å；4.6 × 50mm
色谱条件
流动相a：磷酸盐缓冲液︰水︰乙腈︰甲醇=400︰600︰15︰15；
流动相b：磷酸盐缓冲液︰乙腈︰甲醇=400︰450︰150；
波 长：210 nm；
流 速：1.8 ml/min；
进样量：10 µl；
柱 温：35℃；
梯度程序：
时间/min | 流动相a% | 流动相b/% |
0 | 100 | 0 |
1 | 100 | 0 |
3 | 90 | 10 |
8 | 30 | 70 |
8.1 | 100 | 0 |
11 | 100 | 0 |
结果与讨论
本实验使用venusil® c18 plus，venusil® xbp c18(l)；durashell c18(l)色谱柱对维格列汀分离度试验溶液进行测试，由表2及下图可知，在上述色谱条件下，分离度试验溶液中主峰与相关杂志可实现有效分离。
表2.维格列汀分离度试验溶液测试结果
色谱柱 | 峰序号 | 化合物名称 | 保留时间/min | 理论塔板数 | 分离度 | 拖尾因子 | 备注 |
venusil® c18 plus | 1 | 杂质209-01 | 4.046 | 19642 | 1.10 | — | 图1 |
2 | 杂质202-01 | 4.728 | 24135 | 0.97 | 5.75 | ||
3 | 维格列汀 | 6.067 | 43198 | 0.95 | 11.23 | ||
4 | 杂质207-01 | 6.387 | 86710 | 1.01 | 3.14 | ||
venusil® xbp c18(l) | 1 | 杂质209-01 | 3.474 | 12544 | 1.14 | — | 图2 |
2 | 杂质202-01 | 4.284 | 13971 | 0.90 | 6.02 | ||
3 | 维格列汀 | 5.627 | 35949 | 0.94 | 10.18 | ||
4 | 杂质207-01 | 5.992 | 73213 | 1.03 | 3.52 | ||
durashell c18(l) | 1 | 杂质209-01 | 3.430 | 20015 | 1.16 | — | 图3 |
2 | 杂质202-01 | 4.177 | 18432 | 0.93 | 6.78 | ||
3 | 维格列汀 | 5.477 | 49066 | 0.94 | 11.70 | ||
4 | 杂质207-01 | 5.937 | 49956 | 1.06 | 4.48 |
图1.venusil® c18 plus色谱柱用于维格列汀分离度试验溶液高效液相色谱图
图2.venusil® xbp c18 (l)色谱柱用于维格列汀分离度试验溶液高效液相色谱图
图3.durashell c18 (l)色谱柱用于维格列汀分离度试验溶液高效液相色谱图
结论
本实验使用venusil® c18 plus，venusil® xbp c18(l)；durashell c18(l) 色谱柱对维格列汀分离度试验溶液进行测试，由表2及上图可知，在上述色谱条件下，分离度试验溶液中维格列汀与相关杂质分离度均大于2.5，可满足分析要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil® xbp c18(l) | 3 μm，150 å；4.6 ×50 mm； | 1支 | vx930505-l |
venusil® c18 plus | 5 μm，120 å；4.6 ×50 mm | 1支 | vps950505-a |
durashell c18(l) | 3 μm，150 å；4.6 ×50 mm； | 1支 | dc930505-l |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a；1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
微孔滤膜 | 单膜，13 mm，0.45 μm | 100个/包 | as021345-t |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |