样品信息
表1. 脱氢乙酸样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
脱氢乙酸 | dehydroacetic |  | c8h8o4 | 168.15 | 520-45-6 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱-紫外检测器。
试剂材料
甲醇为色谱纯；
氢氧化钠水溶液（20 g/l）：称取20 g氢氧化钠溶于水并稀释至1 l；
甲酸水溶液（10%）：量取10 ml甲酸加水90 ml混匀；
硫酸锌溶液（110 g/l）：称取110 g硫酸锌溶于水并稀释至1 l；
脱氢乙酸标准工作溶液（纯度98%）：20 g/l氢氧化钠水溶液溶解；
70%甲醇水混合液（70 30）：量取35 ml甲醇，加入15 ml水，混匀。
cleanert s c18 n：2000 mg/12 ml。
前处理方法
样品提取
称取5 g均匀的样品，置于50 ml离心管中，加入10 ml水，5 ml硫酸锌溶液，用20 g/l氢氧化钠水溶液调ph至7.5，转移至50 ml容量瓶中加水稀释至刻度，摇匀后置于50 ml离心管中超声提取10 min。转移至50 ml离心管中，4000 r/min离心10 min，移取20 ml上清液用10%甲酸水溶液调ph至5，用水定容至25 ml待净化。
样品净化
将cleanert s c18 n小柱依次用10 ml甲醇和20 ml水活化，再取上述待净化液5 ml上样于小柱上，用10 ml水淋洗，弃去流出液。再用4 ml 70%甲醇水溶液洗脱并吹干小柱，收集流出液5 ml，涡旋混合，过0.45 µm尼龙针式过滤器，待液相检测。
色谱条件
色谱柱：gemini nx c18，5 µm，110 å，4.6 × 250 mm；
流动相：20 mm乙酸铵水溶液（氨水调节ph至8.5）︰甲醇=90︰10（v/v）；
进样量：10 µl；
流 速：1.0 ml/min；
波 长：293 nm。
结果与讨论
实验结果
由表2可知，采用固相萃取结合hplc-uv的方法检测辣条中的脱氢乙酸，加标回收率为98.2%，能够满足检测要求。由图1 ~ 图3知，用gemini nx c18色谱柱检测脱氢乙酸，峰形良好，保留时间稳定。
表2. 辣条基质加标回收实验结果(添加水平：5 mg/kg，n=3)
物质名称 | 保留时间/min | 平均回收率/% | rsd/% |
脱氢乙酸 | 9.319 | 98.2 | 1.08 |
实验谱图
图1. 1 µg/ml脱氢乙酸标准溶液色谱图
图2. 辣条基质空白色谱图
图3. 5 mg/kg辣条基质加标色谱图
结论
本实验重现了gb5009.121-2016的方法，用cleanert s c18 n结合hplc-uv对加标量为5 mg/kg的辣条样品进行了检测。结果表明，使用cleanert s c18 n固相萃取小柱对辣条基质进行净化，脱氢乙酸的加标回收率为98.2%且rsd小于10%。说明cleanert s c18 n小柱可以用于辣条中脱氢乙酸的净化且方法稳定。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
cleanert s c18 n | 2000 mg/12 ml | 20支/包 | s18200012n |
gemini nx c18 | 5 µm，110 å，4.6 × 250 mm | 1支 | 00g-4454-e0 |
nylon针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.45 µm | 200个/包 | as021345 |
nylon微孔滤膜 | 0.45 µm，50 mm | 100片/盒 | am025045 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |