脱氢乙酸——做食品安全检测总也绕不开的一个不安定份子。严重的峰形拖尾现象和保留时间漂移会在毫无预兆的情况下出现，排查原因和解决问题会耗费实验人员大量时间和精力，严重影响日常的检测工作，更重要的是会造成不必要的加班，我们不想加班啊！
难道脱氢乙酸的液相色谱峰不拖尾就真的做不到吗？
不，agela venusil® c18 plus（p/n :vps952505-a）可以做到。
我们先来看看脱氢乙酸怎么就这么调皮？
图1 脱氢乙酸分子结构式图
脱氢乙酸属于非羧基酸类，在中性或碱性环境下，因为结构中存在c=o 双键的共轭稳定作用，所以使其中一个c=o 烯醇互变为c-o- 的结构，和色谱柱填料表面未键合的硅羟基残基产生强的次级保留，使得峰形变形严重，保留时间漂移。
解决这个问题的好办法是采用封尾色谱柱，让填料表面未键合硅羟基大部分被屏蔽，把次级保留效应降到更低，从而获得对称的峰形，稳定的保留时间。
venusil® c18 plus 色谱柱采用优异的封尾技术，有效降低硅羟基活性，即使强碱性物质也呈现尖锐而对称的峰型。venusil® c18 plus采用高纯硅胶，严格的控制生产工艺和装填工艺，保证了产品极好的重现性。
这么优秀的色谱柱，当然不能只检测一种物质了，苯甲酸、山梨酸、糖精钠和安赛蜜都是食品检测中出镜率非常高防腐剂和甜味剂，用venusil® c18 plus色谱柱可以实现10分钟内完成苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜和脱氢乙酸五种物质的同时检测，并且5种物质的分离度良好，峰型对称，保留时间稳定。
具体实验如下：
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪，紫外检测器；
试剂材料
屈臣氏水；甲醇为色谱纯；乙酸铵为分析纯；
高效液相色谱柱：venusil® c18 plus，5 µm，120 å；4.6 × 250 mm；p/n :vps952505-a
样品制备
标准储备液：精密称取苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸标准品适量，分别制成浓度均为1.0 mg/ml的标准品溶液，混匀，备用；
混合标准溶液：分别吸取苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸的标准储备液各500μl，至10.0 ml的容量瓶中，用水定容至刻度后混匀。
色谱条件
色谱柱：venusil® c18 plus；5µm，120 å ；4.6× 250 mm；
乙酸铵缓冲液：0.02 mol/l乙酸铵溶液，调ph值至8.5；
流动相：甲醇-乙酸铵溶液(8︰92)；
检测波长：230 nm；
流速：1.5 ml/min；
柱温：40℃；
进样量：5 µl。
结果与讨论
本实验参照国标方法，使用venusil® c18 plus色谱柱对苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸的混合标准溶液进行了测试，由表1及图2可知，上述5种物质的分离度良好，能够满足检测要求。
表1.混合标准溶液测试结果
编号 | 组分 | 保留时间 | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 |
1 | 安赛蜜 | 4.457 | 17517 | 1.05 | -- |
2 | 苯甲酸 | 5.692 | 18900 | 1.04 | 8.21 |
3 | 脱氢乙酸 | 6.357 | 18592 | 1.06 | 3.77 |
4 | 山梨酸 | 7.464 | 19506 | 1.06 | 5.53 |
5 | 糖精钠 | 8.514 | 20425 | 1.07 | 4.64 |
图2. venusil® c18 plus测定混合标准溶液图谱
结论
本实验使用venusil® c18 plus色谱柱对苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸混合标准溶液进行了测试。结果表明当检测波长为230nm，流动相的ph值为8.5时， venusil® c18 plus能够10分钟内将以上五种物质分开，脱氢乙酸拖尾因子1.06，峰型对称，满足检测要求。
这么优秀的柱子，赶快来用起来吧！